Puasa minimum 8 jam diperlukan untuk toleransi glukosa. Untuk melakukan tes toleransi glukosa, Anda harus berpuasa dari pukul 21:00 malam sebelum tes, selama sekurang-kurangnya 8 jam, dan tes harus dilakukan antara pukul 7 dan 9 pagi pada hari yang sama. Puasa 8 jam adalah untuk memastikan keakuratan hasil tes. Darah dalam vena selama tes setelah 8 jam puasa akan memastikan keakuratannya. Jika Anda makan atau minum banyak air, Anda akan menghasilkan energi baru atau mengencerkan darah dan faktor-faktor ini dapat menyebabkan hasil tes yang sangat tidak akurat. Namun demikian, jika Anda benar-benar haus pada saat ini, tidak ada masalah dengan mengutip 50 ml air putih untuk melembabkan tenggorokan Anda, tetapi bukan teh, gula, dll. Semakin lama periode puasa, semakin baik. Tidak perlu memulai kelaparan sangat awal dengan sengaja karena takut kadar gula darah akan naik. Organisme manusia memiliki kapasitas yang kuat untuk mengatur diri sendiri dan ketika berpuasa dalam waktu yang lama, hal itu juga dapat menyebabkan distorsi hasil tes. Hal ini bisa menyebabkan angka-angka terlihat normal dan menutupi hasil yang sebenarnya.