Tes 21 hari untuk sifilis tidak mengesampingkan sifilis jika negatif, karena infeksi sifilis diikuti oleh periode jendela sifilis, yang merupakan periode infeksi laten. Ketika seorang pasien dengan dugaan sifilis terinfeksi spirochete, spirochete akan berkembang biak di dalam tubuh pasien, tetapi pada tahap awal tingkat spirochete lemah dan keberadaan spirochete tidak selalu terdeteksi oleh tes serologis rutin untuk sifilis, biasanya dalam jangka waktu 40-90 hari. Dalam praktik klinis, dokter akan merekomendasikan agar pasien dites 1 bulan, 3 bulan, dan 6 bulan setelah aktivitas seksual yang dicurigai atau infeksi yang dicurigai, dan diagnosis negatif sifilis dibuat jika ketiga tes tersebut mengecualikan sifilis.