Saat ini, tiga serangkai eritrositosis sejati (PV), trombositemia esensial (ET), dan mielofibrosis primer (PMF) dikenal sebagai neoplasma mieloproliferatif kromosom negatif (MPN) Philadelphia. Penemuan mutasi gen JAK2V617F satu dekade yang lalu dapat dianggap sebagai tonggak sejarah dalam diagnosis molekuler MPN, dan juga telah memfasilitasi penelitian dasar dalam genetika dan biologi MPN, klasifikasi ulang penyakit, serta pengembangan agen terapeutik baru dan aplikasi klinis. I. Mutasi gen JAK2 V617F Penelitian telah mengkonfirmasi bahwa mutasi gen ini terdapat pada 95% pasien PV dan 50%-60% pasien ET dan PMF; tumor mieloid lainnya seperti acute myeloid leukaemia (AML) dan MDS juga dapat mengalami mutasi dengan frekuensi yang rendah, terutama anemia granulositik besi tipe cincin dengan trombositosis (RARS-T). Penanda molekuler ini telah menjadi dasar diagnostik yang penting untuk PV, ET, dan PMF dalam klasifikasi WHO. Pada kasus yang tidak memenuhi kriteria diagnostik WHO, keberadaan mutasi JAK2V617F menunjukkan adanya potensi risiko MPN atau bentuk subklinis MPN yang tidak aktif, ditemukan bahwa ada dua jenis mutasi JAK2 V617F, yaitu murni dan heterozigot, ET hampir selalu heterozigot, sedangkan 28% dari pasien dengan PV dan 14% dari pasien dengan PMF adalah murni. Beban alel JAK2 V617F secara berbeda dikaitkan dengan fenotipe MPN yang berbeda dan memiliki signifikansi prognostik: pasien PV dengan beban mutasi JAK2V617F yang tinggi lebih mungkin mengembangkan mielofibrosis dan trombosis, peningkatan jumlah sel darah putih dan kadar hemoglobin, penurunan jumlah trombosit, dan splenomegali; pada pasien ET, tingkat JAK2V617F berkorelasi positif dengan jumlah sel darah putih dan negatif dengan jumlah trombosit. Kedua, mutasi JAK2 ekson 12 Mutasi gen JAK2V617F terdapat pada sekitar 97% kasus PV. Mutasi JAK2 ekson 12 harus diuji lebih lanjut pada beberapa kasus mutasi-negatif, di mana terdapat hiperplasia eritroid yang ditandai dan penurunan kadar eritropoietin (EPO), tanpa hiperplasia megakariosit atau granulosit. pasien dengan ET dan PMF pada dasarnya bebas dari mutasi JAK2 ekson 12. Penelitian telah menunjukkan bahwa mutasi ekson 12 JAK2 dapat berupa substitusi, delesi, insersi, atau duplikasi gen. Secara klinis, pasien dengan mutasi JAK2 ekson 12 berusia lebih muda, sekitar 40% pasien berusia di bawah 50 tahun, dan cenderung menunjukkan hiperplasia garis keturunan eritroid murni (kadar hemoglobin dan volume sel darah yang lebih tinggi), meskipun sebagian kecil pasien mengalami hiperplasia garis keturunan rangkap tiga. Karena mutasi ekson 12 JAK2 cenderung diekspresikan pada tingkat yang rendah, maka sangat penting untuk memilih tes yang sesuai dan sangat sensitif. Mutasi MPL ekson 10 Satu tahun setelah ditemukannya mutasi JAK2V617F, mutasi onkogen virus leukemia mieloproliferatif (MPL) ditemukan pada pasien dengan ET dan PMF yang negatif terhadap mutasi tersebut, tetapi tidak pada pasien dengan PV. gen MPL, yang terletak di kromosom 1p34, mengkode reseptor trombopoietin dan memengaruhi proliferasi dan diferensiasi megakariosit. Mutasi yang didapat pada kodon W515 secara konstitutif mengaktifkan reseptor trombopoietin melalui aktivasi sitokin pada jalur JAK-STAT hilir. Dua mutasi yang paling umum adalah W515L dan W515K, yang terdapat pada 15% pasien MPN JAK2 V617F-negatif, di mana 5% dari ET dan lebih dari 10% pasien PMF dapat memiliki mutasi ini. Selain itu, mutasi MPL dapat terjadi bersamaan dengan mutasi JAK2 V617F. Mutasi MPL ekson 10 sering dikelompokkan di sekitar asam amino 515 di daerah transmembran. Mutasi penyebab penyakit yang dapat direproduksi biasanya mencakup mutasi W515L dan W515K, serta mutasi W515A, W515R, dan W515S yang jarang terjadi. fenotipe klinis pasien dengan mutasi MPL ekson 10 sering kali merupakan salah satu dari kadar hemoglobin yang relatif rendah. Dibandingkan dengan pasien ET yang positif untuk mutasi JAK2V617F, pasien ET dengan mutasi MPL memiliki jumlah trombosit yang lebih tinggi, megakariositosis yang ditandai, dan kadar EPO serum yang lebih tinggi. mutasi W515K memiliki beban mutasi alel yang lebih tinggi dibandingkan pasien dengan mutasi W515L, yang menunjukkan bahwa mekanisme dari kedua varian tersebut mungkin berbeda. Skrining untuk mutasi MPL sangat dianjurkan untuk pasien dengan dugaan ET atau PMF tanpa mutasi JAK2 dan CALR. Mutasi IV.CALR ekson 9 Gen CALR mengkode calreticulin, suatu pengikat molekul pengikat kalsium yang terkait dengan retikulum endoplasma. Mutasi CALR yang terkait dengan MPN adalah insersi, delesi, atau keduanya pada ekson 9 dan biasanya merupakan mutasi heterozigot. Mutasi CALR telah ditemukan pada 60% hingga 80% pasien dengan mutasi JAK2 dan MPL yang negatif dengan ET dan MPF, dan kadang-kadang pada pasien dengan MDS-RARS-T, jarang pada pasien dengan PV, dan jarang terjadi bersamaan dengan mutasi JAK2V617F atau BCR-ABL. Analisis retrospektif ET dan PMF menemukan bahwa pasien dengan mutasi CALR menunjukkan jumlah trombosit yang lebih tinggi, kadar hemoglobin yang rendah, dan kelangsungan hidup yang lebih tinggi secara keseluruhan dibandingkan pasien dengan mutasi JAK2, mutasi MPL, atau triple negatif. Relatif terhadap pasien JAK2-negatif, pasien ET dengan mutasi CALR memiliki lebih sedikit kejadian trombotik dan kardiovaskular serta insiden mielofibrosis yang lebih tinggi, dan pasien dengan PMF positif CALR memiliki insiden ketergantungan transfusi eritrosit yang lebih rendah dan kelangsungan hidup yang lebih tinggi. pemantauan.