Ultrasonografi 4D dilakukan antara 20-28 minggu, dengan waktu terbaik umumnya antara 22-26 minggu. Bergantung pada hasil NT pertama pasien, pasien dapat berdiskusi dengan dokter untuk pemeriksaan kedua pada usia kehamilan 22-26 minggu. Ultrasonografi 4D perlu dilakukan tiga kali selama kehamilan, pertama kali pada usia kehamilan 11-13 minggu untuk melakukan mini-4D untuk melihat ketebalan NT. Kedua kalinya, pada usia kehamilan 22-26 minggu, 4D utama pertama dilakukan. Ketiga kalinya adalah sekitar 30-32 minggu kehamilan, untuk melakukan empat dimensi besar ketiga. 22-28 minggu antara struktur janin telah terbentuk sepenuhnya, dan ukuran janin dan cairan ketuban lebih sesuai, dan dalam ruang aktivitas rahim lebih besar, gema tulang janin memiliki dampak yang lebih kecil pada gambar yang relatif jelas, dapat fokus pada deteksi malformasi perkembangan organ janin. Oleh karena itu, USG 4D kedua disarankan untuk memilih 22-26 minggu terbaik untuk dilakukan, tidak disarankan melebihi 26 minggu. Kesimpulannya, USG 4D adalah pemeriksaan skrining utama, yang dapat memeriksa permukaan tubuh janin, tetapi pemeriksaan USG 4D lebih intens, perlu dipesan terlebih dahulu, ibu hamil perlu memperhatikan agar tidak melewatkan waktu terbaik.