Untuk mengetahui secara klinis apakah seseorang alergi terhadap penisilin, riwayat medis perlu diambil terlebih dahulu. Jika ada riwayat alergi sebelumnya terhadap banyak makanan atau obat-obatan, mungkin ada alergi terhadap penisilin. Jika tidak ada riwayat alergi sefalosporin atau penisilin yang jelas, penentuan lebih lanjut pada saat ini dapat dilakukan dengan tes kulit, yang melibatkan pengambilan sejumlah kecil larutan penisilin dan menyuntikkannya ke dalam tubuh dan mengamati reaksi kekebalan tubuh seperti kemerahan, pembengkakan dan nodul keras. Jika tes kulit positif, ini kemudian akan menunjukkan alergi terhadap penisilin. Jika tes kulit negatif, pengobatan dengan penisilin dapat dilanjutkan, tetapi tidak ada jaminan 100% bahwa Anda tidak akan alergi terhadap penisilin ketika diberikan, jadi penting untuk memantau dengan tepat. Jika tidak ada alergi yang signifikan seperti sesak dada, ruam atau kulit gatal pada saat penyuntikan atau untuk jangka waktu setelahnya, maka tidak ada alergi terhadap penisilin.