Untuk menentukan distribusi sel induk epitel pada membran timpani, perubahan sel induk setelah perforasi membran timpani, karakteristik pertumbuhan kultur in vitro dari berbagai bagian epitel membran timpani, dan untuk menetapkan metode untuk kultur in vitro dan proliferasi sel induk timpani. Empat tikus SD muda dan empat tikus SD dewasa diamati sebagai membran timpani normal, dan 28 tikus dewasa dilubangi di pusat 2 mm ketegangan membran timpani. Bagian beku dari membran timpani diambil pada waktu yang berbeda setelah perforasi untuk deteksi imunohistokimia β1 integrin dan keratin 19. Membran timpani 30 tikus SD dewasa dirusak dengan mitomisin C pada permukaan mukosa dan dibagi menjadi dua bagian, epitel cincin timpani dan epitel pusat yang tegang, untuk membandingkan waktu proliferasi sel sel di kedua cincin timpani dan bagian tegang. Sel-sel cincin timpani diklasifikasikan menurut waktu aposisi menggunakan 1 jam sebagai standar. Keratin 19 dan sel β1 integrin-positif didistribusikan di cincin timpani dan daerah tangkai tulang palu di bagian tegang dan tersebar di bagian yang rileks, dengan tidak ada sel positif di bagian tengah bagian yang tegang. Tidak ada perbedaan antara tikus remaja dan dewasa. Jumlah sel positif pada cincin timpani dan tangkai tulang palu meningkat setelah perforasi akut pada bagian tegang, dan tidak ada pewarnaan positif di tepi perforasi. Kultur in vitro sel epitel cincin timpani membutuhkan waktu yang jauh lebih sedikit untuk berkembang biak daripada epitel pusat dari ujung tegang, dan sel yang menempel pada dinding dalam waktu 1 jam secara aktif tumbuh, menghasilkan koloni yang lebih besar, dan kaya akan sel induk epitel. Sel induk epitel didistribusikan di daerah cincin timpani dan tangkai tulang palu di bagian tegang membran timpani, tanpa sel induk di bagian tengah bagian tegang. Dalam media kultur yang sesuai, sel punca berproliferasi dengan baik dan pada awalnya dapat dimurnikan dengan waktu pengaplikasian.