Waktu terbaik untuk melakukan USG 4D selama kehamilan adalah antara 20-24 minggu seperti yang direkomendasikan oleh pedoman perawatan kesehatan kehamilan saat ini, meskipun akan bervariasi untuk setiap wanita hamil. Pada usia kehamilan 20-24 minggu, anggota tubuh dan organ utama janin sudah matang, dan ukuran janin serta volume cairan ketuban ibu hamil lebih sesuai untuk melakukan USG 4D untuk mendapatkan gambar yang lebih jelas. Pemeriksaan ini dapat melihat dengan jelas perkembangan janin, dan dapat lebih akurat menentukan apakah janin memiliki kelainan perkembangan bawaan, seperti bibir sumbing dan langit-langit mulut, mikrosefali, spina bifida, dll. Selain itu, dapat melakukan penilaian terhadap volume cairan ketuban, panjang tulang paha janin, dan diameter biparietal, sehingga dapat menentukan apakah janin sesuai dengan usia kehamilan. Sebelum 20 minggu, semua organ janin mungkin belum matang, dan hasilnya mungkin tidak akurat; setelah 28 minggu, karena janin tumbuh terlalu besar dan cairan ketuban berkurang, mengakibatkan aktivitas janin lebih rendah, yang mudah menyebabkan diagnosis yang terlewat, sehingga disarankan agar ibu hamil melakukan pemeriksaan 4D pada minggu kehamilan yang sesuai.