Penyakit alergi adalah respons imun patologis yang terjadi ketika organisme tidak toleran terhadap atau berbagai zat, dan kejadian penyakit ini cenderung meningkat setiap tahun di seluruh dunia selama 20-30 tahun terakhir, dengan peningkatan 5% dalam jumlah anak-anak dengan asma alergi setiap tahun di Inggris. Cakupan penyakit ini meliputi dermatologi, otorhinolaringologi, pengobatan pernapasan, gastroenterologi dan pediatri, serta menimbulkan berbagai tingkat risiko bagi kesehatan manusia, dan pada kasus yang parah bahkan dapat menyebabkan kondisi yang mengancam jiwa. Lebih dari 300 antigen telah diidentifikasi sebagai penyebab penyakit alergi [1], dan identifikasi alergen merupakan kunci untuk diagnosis penyakit alergi, imunoterapi spesifik, dan pencegahan paparan alergen lebih lanjut. Saat ini, ada berbagai macam metode dan reagen deteksi alergen di Cina, yang membuat hasil tes memiliki perbedaan besar, dan membawa kebingungan pada diagnosis dan pengobatan klinis. Namun, artikel ini berfokus pada metode deteksi alergen, analisis hasil, masalah, dan panduan untuk pengobatan yang akan ditinjau, untuk pekerjaan standarisasi klinis sebagai referensi. 1, uji in vivo Penyakit alergi adalah reaksi alergi tipe I yang diperantarai IgE yang timbul dengan cepat, dan deteksi alergen dapat dilakukan secara in vivo dan in vitro. Tes in vivo dapat menunjukkan reaksi kulit dan selaput lendir yang disebabkan oleh degranulasi sel mast. Larutan bercak alergen dan larutan tes kulit yang umum digunakan di Tiongkok adalah: larutan yang dimurnikan yang disediakan oleh laboratorium Departemen Reaksi Metabolik Rumah Sakit Peking Union Medical College, dan reagen terstandarisasi yang disediakan oleh AllergoPharma Jerman dan ALK Denmark. Produk yang berbeda memiliki prinsip yang sama, metode operasi kurang lebih sama, dan hasilnya dinilai sama, tetapi hasil yang diperoleh tidak sama karena perbedaan konsentrasi alergen yang dikandungnya. 1.1 Uji tusuk kulit (skin test) 1.1.1 Metode dan hasil Uji tusuk kulit (skin prick test, SPT) dengan larutan tusuk standar dari perusahaan AllergoPharma Jerman sebagai contoh. Metode: Larutan tusuk alergen diteteskan ke kulit sisi telapak tangan lengan bawah, dan jarum tusuk ditusukkan secara vertikal ke dalam kulit melalui tetesan larutan uji pada kulit, dan hasil tes dibaca setelah 10-20 menit, dengan 0,4% larutan garam fenol sebagai kontrol negatif, dan larutan histamin 0,1% yang mengandung 0,4% fenol sebagai kontrol positif. Hasilnya dinilai sebagai berikut: munculnya dermatom kekuningan dengan eritema di sekitarnya adalah reaksi positif. Jika dermatom lebih besar dari histamin, itu adalah ++++, jika dermatom sama dengan histamin, itu adalah ++++, jika dermatom lebih kecil dari histamin, itu adalah ++ atau ++, dan jika dermatom sama dengan garam, itu negatif. Tes intradermal (IT) dilakukan dengan larutan tes kulit standar dari AllergoPharma, Jerman. Metode: 0,01 ～ 0,05 ml larutan tes kulit disuntikkan ke kulit lengan atas bagian luar atau punggung, dan hasil tes dibaca setelah 10 ～ 20 menit. Kontrol, solusi tes kulit alergen untuk memberikan unit dan hasil penilaian seperti di atas. 1.1.2 Aplikasi klinis Tes kulit telah diterapkan pada pekerjaan klinis selama lebih dari 100 tahun, dan dapat digunakan untuk diagnosis rinitis alergi, eksim, asma alergi dan penyakit alergi lainnya serta imunoterapi spesifik sebelumnya, dengan spesifisitas tinggi, tingkat positif palsu yang rendah, sederhana, akurat, dan ekonomis. Uji tusuk kulit direkomendasikan oleh Asosiasi Alergi dan Imunologi Klinis Eropa (European Association of Allergy and Clinical Immunology/EAACI) sebagai metode diagnostik in vivo yang terbaik karena keamanannya, kemudahan pengoperasian, sensitivitas tinggi, relevansi klinis yang baik, rasa sakit yang lebih sedikit, efek samping yang lebih sedikit, serta cocok untuk anak-anak dan yang sangat sensitif [2]. Kontraindikasi: mereka yang memiliki riwayat syok anafilaksis akibat tes kulit penisilin; penyakit yang secara signifikan mengganggu kondisi sistemik; penyakit dengan lesi kulit di tempat tes; pasien yang menerima β-blocker atau ACE inhibitor; pasien dengan alergi adrenalin; kehamilan; dan mereka yang berusia di bawah 5 tahun. Kontraindikasi relatif: mengonsumsi antihistamin dalam waktu 3 kali waktu paruh obat; cobalah untuk melakukan diagnosis ketika gejala tidak terlalu terasa, jika memungkinkan. Komplikasi: ruam lokal, nekrosis kulit; efek samping serius sistemik yang sangat jarang terjadi seperti anafilaksis, edema laring. Sebelum tes dimulai, riwayat medis yang terperinci harus diambil, dan tes harus dilakukan di rumah sakit yang berpengalaman dan dilengkapi dengan kemampuan dan peralatan resusitasi. 1.2 Uji provokasi spesifik (uji provokasi spesifik) adalah uji yang mensimulasikan kondisi morbiditas alami dan menggunakan sejumlah kecil alergen untuk menyebabkan serangan alergi ringan untuk menentukan alergen. Menurut bagian yang berbeda dari patogenesis pasien, tes provokasi organ yang berbeda dapat dilakukan. 1.2.1 Metode dan hasil tes provokasi bronkial: mengukur volume gaya ekspirasi detik pertama (FEV-1) dan kapasitas paru-paru sebelum tes; menghirup cairan kontrol atau cairan antigenik, dan memeriksa ulang FEV-1 15-20 menit setelah terhirup Kriteria untuk menentukan hasil positif adalah sebagai berikut: (1) kesadaran diri yang jelas akan gejala, seperti rasa mendesak di dada dan mengi; (2) paru-paru dapat mendengar suara gemuruh; (3) penurunan FEV-1 lebih dari 20%. 20% atau lebih. Tes eksitasi mukosa hidung dapat dilakukan dengan metode inhalasi antigen (bubuk) atau metode tetes (cair), edema mukosa dan pucat muncul setelah 15-20 menit terpapar antigen, dan pasien memiliki gejala seperti gatal pada hidung, pilek, bersin, dll., yang dapat dinilai sebagai reaksi positif. Tes eksitasi konjungtiva akan menjadi konsentrasi yang tepat dari tetesan alergen yang menetes ke dalam konjungtiva di satu sisi pasien, sisi lain dari tetesan garam sebagai kontrol; 15 ~ 20 menit untuk mengamati hasilnya. Kemacetan konjungtiva, edema, peningkatan sekresi, gatal, dan bahkan kemerahan kelopak mata pada sisi tes dianggap sebagai reaksi positif. 1.2.2 Aplikasi klinis: indikasi untuk tes eksitasi adalah pasien yang diduga kuat memiliki penyakit alergi, tetapi tes kulit dan tes in vitro negatif; pasien yang alergi terhadap beberapa alergen dan mencari alergen yang bertanggung jawab; dan pasien dengan asma alergi untuk mengetahui toleransinya sebelum imunoterapi. Pasien dengan alergi makanan adalah standar emas untuk diagnosis. Tes provokasi lebih spesifik daripada tes kulit dan berkorelasi lebih baik dengan riwayat, gejala, dan tes adsorpsi alergen pasien. Tes ini memiliki potensi bahaya menyebabkan serangan asma akut yang parah atau syok anafilaksis dan komplikasi serius lainnya, konsentrasi antigen yang digunakan tidak boleh terlalu tinggi, harus ditingkatkan dari yang kecil ke yang besar; tes harus dipersiapkan untuk serangkaian resusitasi sebelum tes. 1.3 Uji tempel atopik (APT) 1.3.1 Metode dan hasil Ambil alat uji dan uji tempel alergen standar Eropa dari Swedish Chemical Diagnostics AB sebagai contoh. Jumlah alergen yang sesuai ditempatkan di ruang kecil alat uji tempel, dan untuk alergen cair, selembar kertas saring ditempatkan di alat uji tempel terlebih dahulu, lalu tetes alergen ditambahkan. Pita uji tempel dengan alergen yang ditambahkan dioleskan ke kulit punggung pasien di bawah skapula tanpa lesi, dan diberi label, dan pasien diinstruksikan untuk melarang aktivitas berat selama 3 hari, dan uji tempel dilepas dan diamati setelah 48 jam, dan kemudian diamati lagi pada 72 jam untuk menentukan hasilnya [3]. Kriteria interpretasi didasarkan pada kriteria yang direkomendasikan oleh International Contact Dermatitis Research Group[4] . 1.3.2 Aplikasi klinis Secara klinis, ini terutama digunakan untuk mendiagnosis dermatitis kontak, yang mudah digunakan dan memiliki hasil yang akurat. Sensitivitas uji tempel adalah 97,8%, spesifisitas 76,9%, akurasi 90,3%, nilai prediksi positif 88,2%, nilai prediksi negatif 95,2%. Kontraindikasi relatif: mereka yang memiliki lesi kulit yang luas. Efek sampingnya ringan, ruam dan gatal-gatal telah dilaporkan [3]. 2, uji in vitro Uji in vitro adalah uji imunokimia, umumnya mendeteksi sIgE dalam serum. indikasi adalah: (1) lesi kulit yang luas, tidak dapat dilakukan tes kulit; (2) riwayat reaksi alergi parah yang diinduksi antigen, tes in vivo memiliki tingkat risiko tertentu; (3) mengonsumsi antihistamin setelah penghambatan reaksi kulit, hasil tes kulit tidak akurat; (4) antigen tidak dapat digunakan sebagai tes kulit, seperti bahan kimia, dll. [2]; (5) hasil tes kulit dengan hasil klinis klinis antigen dan tes kulit [2]; (5) hasil tes kulit dengan hasil klinis tes kulit. ) Hasil tes kulit tidak konsisten dengan riwayat klinis dan perlu dianalisis dan diverifikasi lebih lanjut; (6) Alergen yang bertanggung jawab diidentifikasi dengan jelas sebelum imunoterapi spesifik. Tes in vitro aman tanpa efek samping dan kontraindikasi. Di dalam negeri telah muncul berbagai sistem deteksi, berikut ini adalah prinsip-prinsip yang berbeda yang dijelaskan. 2.1 Uji penyerap alergen radioaktif (RAST) 2.1.1 Prinsip dan hasil deteksi Sistem Uni-CAP yang diproduksi oleh Pharmacia (Swedia) adalah sistem yang paling representatif, dan prinsip dasarnya adalah menyerap alergen pada jenis padatan baru yang disebut immune CAP, yang merupakan polimer pembawa hidrofilik dalam kapsul kecil. Prinsip dasarnya adalah adsorpsi alergen pada jenis padatan baru yang disebut immuno CAP, yang merupakan polimer pembawa hidrofilik dalam kapsul kecil, yang disintesis dari turunan selulosa teraktivasi, dengan daya ikat yang sangat tinggi terhadap alergen. Setiap CAP pembawa fase padat dienkapsulasi dengan alergen yang berbeda, yang secara khusus mengikat alergen jika ada dalam serum pasien, dan kemudian serum anti-IgE anti-manusia kelinci berlabel enzim (ELISA) ditambahkan untuk membentuk kompleks pembawa-fase padat-alergen-IgE-ELISA. Setelah pencucian dan penambahan matriks, akhirnya menambahkan larutan pengembangan, memancarkan fluoresensi, sesuai dengan konversi absorbansi fluoresensi kandungan IgE, absorbansi fluoresensi serum yang akan diuji lebih besar dari produk referensi positif, kurang dari produk referensi negatif, prosedur operasi utama secara otomatis diselesaikan oleh instrumen, dan instrumen secara otomatis mencetak hasilnya [5]. Hasilnya dikuantifikasi sesuai dengan standar 75P502 yang dikembangkan oleh WHO untuk mendeteksi sIgE, dan hasilnya ditentukan sebagai berikut: <0,35KUPL adalah kelas 0; 0,35-0,7KUPL adalah kelas 1; 0,7-3,5KUPL adalah kelas 2; 3,5-17,5KUPL adalah kelas 3; 17,5-50,0KUPL adalah kelas 4; 50,0-100,0KUPL adalah kelas 5; > 100,0KUPL adalah kelas 5. >100.0KUPL adalah kelas 6 [2]. 2.1.2 Karakteristik sistem: sistem CAP memiliki kondisi reaksi yang sangat baik dan jarak difusi yang pendek, dan hasilnya memiliki sensitivitas dan spesifisitas yang tinggi, dengan nilai ekspektasi positif lebih dari 95%. Tingkat kepatuhan antara tes kulit alergen dan hasil CAP tinggi, mencapai 86,2% hingga 96,6%; korelasi antara keduanya baik, dengan koefisien korelasi peringkat antara 0,661 dan 0,957 [5]. Satu alergen satu tutup reaksi, pilihan klinis, bisa lebih atau kurang, kombinasi apa pun, untuk menghindari pemborosan yang tidak perlu. Jumlah darah yang diambil sedikit dan tidak terlalu menyakitkan. 2.2 Enzyme-linked immunoassay (ELISA) 2.2.1 Prinsip dan hasil deteksi: Ambil contoh kit deteksi alergen in vitro perusahaan ASI Amerika, prinsip dasarnya adalah: ketika pembawa dengan antigen alergi yang dipadatkan di permukaan dan serum pasien dibiakkan bersama, IgE spesifik dalam serum secara spesifik akan mengikat antigen, dan antibodi yang secara spesifik terikat pada antigen dapat dikenali oleh antibodi sekunder yang terkait dengan enzim, dan setelah penambahan kromogen, enzim yang terkait dengan antibodi sekunder membuat tutup reaksi menjadi reaktif. Enzim yang terkait dengan antibodi sekunder mengubah pengembang warna dari jingga menjadi biru. Kedalaman pengembangan warna berbanding lurus dengan IgE spesifik dalam serum; ini dapat secara kualitatif / semi-kuantitatif mendeteksi konsentrasi IgE spesifik dalam serum. Penentuan hasil: berdasarkan perbedaan perkembangan warna, dapat diidentifikasi menjadi 5 tingkatan (0-4). 2.3 Metode imunobloting 2.3.1 Prinsip dan hasil deteksi: Sebagai contoh, gunakanlah Sistem Deteksi Alergen AlleryScreen yang diproduksi oleh MEDIWISS, Jerman. Alergen spesifik diadsorpsi pada permukaan membran nitroselulosa, diinkubasi dengan penambahan serum pasien, dan IgE spesifik dalam spesimen bereaksi dengan alergen dan berikatan dengan membran nitroselulosa. Streptavidin berlabel alkali fosfatase ditambahkan dan berikatan dengan biotin. Setelah inkubasi dengan penambahan substrat yang diaktifkan enzim BCIP / NBT, reaksi kromogenik enzim spesifik substrat terjadi dan endapan muncul pada strip reagen. Warna warna sebanding dengan kandungan antibodi sIgE dalam serum. Setelah strip reagen dikeringkan, itu terdeteksi oleh monitor alergen khusus dan hasil tes kuantitatif dibaca. 2.3.2 Karakteristik sistem: sementara metode lain secara kovalen mengikat alergen ke fase padat, alergen pekat dalam sistem ini tidak dimodifikasi dan dilekatkan pada membran nitroselulosa, dan penggunaan sistem amplifikasi afinitas-biotin memungkinkan untuk mendeteksi bahkan sejumlah kecil IgE. Sistem AlleryScreen memiliki sensitivitas yang sangat baik yang serupa dengan sistem CAP tetapi sedikit lebih rendah daripada tes kulit. Sistem AlleryScreen memiliki sensitivitas yang sangat baik, mirip dengan sistem CAP, tetapi sedikit lebih rendah dari tes kulit. Sistem ini dapat mendeteksi hingga 20 antigen dalam satu spesimen dan hanya membutuhkan 250 μl serum, yang dapat digunakan sebagai tes skrining klinis. Pemilihan dan diagnosis tes klinis alergen Diagnosis alergen penyakit alergi adalah proses yang komprehensif, termasuk riwayat klinis yang jelas (riwayat alergi inhalasi alergen, alergi kontak dan alergi makanan), tes kulit, tes eksitasi spesifik dan deteksi IgE spesifik serum dan sebagainya. Uji tusuk kulit lebih disukai karena sederhana, ekonomis dan aman. Ketika tes kulit konsisten dengan riwayat medis, diagnosis dapat ditegakkan. Hasil tes kulit harus dianalisis bersama dengan riwayat medis; tes kulit positif, konsisten dengan riwayat medis, menunjukkan bahwa itu adalah sensitisasi penyakit; sebaliknya, riwayat medis negatif dan tes kulit negatif pada dasarnya menunjukkan bahwa alergen tidak terkait dengan penyakit [2]. Tes kulit untuk mendiagnosis sensitisasi alergen multipel harus dilakukan dengan serum IgE dan tes provokasi untuk mengidentifikasi alergen yang bertanggung jawab. Jika tes kulit tidak konsisten dengan riwayat medis, tes IgE serum dan tes provokasi lebih lanjut harus dilakukan untuk analisis yang komprehensif. Tes IgE spesifik serum dapat digunakan sebagai kontraindikasi tes kulit, pada pasien yang tes kulitnya tidak sesuai dengan riwayat medis mereka, dan pada pasien yang tes kulitnya mendiagnosis sensitivitas alergen multipel. Pada pasien dengan sensitivitas alergen multipel, alergen dengan tes kulit yang tinggi dan klasifikasi IgE spesifik serum dapat dianggap sebagai alergen yang bertanggung jawab. Tes provokasi terstandarisasi adalah metode diagnostik spesifik yang paling dapat diandalkan, terutama pada pasien dengan alergi makanan, karena tes provokasi makanan acak tersamar ganda merupakan standar emas untuk diagnosis alergi makanan karena akurasi tes kulit yang buruk dan hasil IgE spesifik untuk alergen makanan. Uji eksitasi tidak dapat digunakan sebagai uji klinis rutin karena potensinya untuk menginduksi reaksi alergi yang parah. Ketika tes kulit dan IgE spesifik serum negatif, dan ada riwayat klinis yang jelas tentang paparan alergen dan alergi, ada kebutuhan untuk mengkonfirmasi diagnosis; ketika berbagai alergen telah didiagnosis alergi, tidak dapat mengidentifikasi alergen yang bertanggung jawab; pasien asma alergi pada imunoterapi spesifik, untuk menilai toleransi pengobatan, tes eksitasi dapat dilakukan. Tes provokatif harus dilakukan hanya jika sangat diperlukan, dengan persetujuan pasien, dengan tindakan penyelamatan dan kemampuan untuk menyelamatkan pasien, dan dengan penanganan efek samping yang tepat waktu. Tidak disarankan untuk melakukan tes provokasi selama eksaserbasi. Kesimpulannya, diagnosis alergen memerlukan penilaian yang menyeluruh dan benar oleh dokter yang berpengalaman berdasarkan riwayat dan pemeriksaan.