1. Latar belakang.
Kanker ginjal adalah keganasan umum pada saluran kemih. Menurut American Society of Oncology, ada sekitar 40.000 kasus baru kanker ginjal di Amerika Serikat setiap tahun, dan insiden kanker ginjal di seluruh dunia meningkat sebesar 2% setiap tahun, dengan hampir 100.000 kematian akibat kanker ginjal setiap tahun. Hampir separuh dari semua pasien kanker ginjal sudah berada pada stadium lanjut ketika pertama kali didiagnosis, dan sekitar 40% pasien mengalami kekambuhan atau metastasis setelah pembedahan. Tingkat kelangsungan hidup tiga tahun bagi mereka yang tidak menerima pengobatan kurang dari 5%, dan survei epidemiologi terkait di Tiongkok juga menunjukkan bahwa jumlah kasus kanker ginjal baru di Tiongkok meningkat dari tahun ke tahun. Saat ini, metode pengobatan utama untuk kanker ginjal adalah reseksi bedah. Radioterapi dan kemoterapi tidak efektif secara signifikan dalam pengobatan kanker ginjal. Namun, tingkat remisi IL-2 rendah dan insiden efek samping toksiknya tinggi. Efek samping toksik yang disebabkan oleh IL-2, seperti sindrom kebocoran kapiler dan gejala gastrointestinal, membuat banyak pasien kanker ginjal yang telah menyebar tidak dapat mentolerir dosis tinggi obat tersebut.
Setelah lebih dari 20 tahun penelitian dan praktik, imunoterapi seluler biologis (DC-CIK) telah menjadi pendekatan baru untuk pengobatan kanker ginjal metastasis yang efektif. Imunoterapi yang tepat dapat membantu menghilangkan sisa sel kanker dari tubuh pasien dan mengatasi metastasis subklinis yang sulit diatasi dengan terapi konvensional, sehingga semakin meningkatkan dan memantapkan efikasi kanker ginjal, mengurangi kekambuhan dan meningkatkan kualitas hidup pasien tumor.
1.1. Vaksin Tumor DC
Terapi vaksin tumor digunakan untuk menstimulasi respons imun anti-tumor spesifik pasien dengan memasukkan antigen tumor ke dalam tubuh pasien, yang memiliki keunggulan spesifisitas dan pemeliharaan efek imun yang lama secara in vivo.
Karena masalah inti dari penghindaran tumor oleh sistem kekebalan tubuh adalah bahwa antigen tumor tidak secara efektif dikirim ke limfosit T, metode pengiriman antigen yang paling efektif adalah bahwa sel penyaji antigen memiliki antigen tumor dan sistem pensinyalan pertama dan kedua yang berfungsi penuh. Oleh karena itu, vaksin tumor saat ini lebih fokus pada vaksin seluler, baik dengan meningkatkan sistem pensinyalan pertama dan kedua dari sel tumor untuk membuatnya menjadi APC yang berfungsi penuh, yang disebut vaksin sel tumor yang dimodifikasi, atau dengan menggunakan APC profesional untuk mengambil, memproses, dan mengirimkan antigen tumor, sebagian besar menggunakan vaksin DC dengan antigen tumor yang dimuat.
Sel dendritik (DC) saat ini dianggap sebagai sel penyaji antigen yang paling penting dalam imunitas tumor. Mereka menginduksi, mengaktifkan dan memperbanyak limfosit T sitotoksik (CTL) dengan mengambil antigen tumor dan mempresentasikannya ke limfosit T, memediasi imunitas seluler anti-tumor yang kuat dan spesifik. DC yang diperoleh secara in vitro memiliki fungsi penyaji antigen yang sama dengan DC dewasa yang dimurnikan secara in vivo, yang merupakan dasar penggunaannya dalam pengobatan klinis keganasan.
1.1.1. Karakteristik utama DC dewasa
(i) Permukaan sel memiliki banyak tonjolan dendritik yang tidak beraturan;
(2) Permukaan sel kaya akan molekul yang berkontribusi pada presentasi antigen, seperti molekul MHC kelas I dan II, molekul co-stimulatory B721 dan B722, molekul adhesi sel ICAM21 dan ICAM23, dan antigen terkait fungsi limfosit L FA21 dan L FA23, dll;
(iii) Dalam respons limfosit campuran, ia mengaktifkan sel T reaktif diri dari MHC yang sama dan sel T alogenik dari MHC yang berbeda, dan fitur yang paling penting adalah bahwa hal itu dapat secara signifikan merangsang proliferasi sel T awal (Naive T calls) dan membangun respons imun primer;
Kemampuan untuk bermigrasi ke area sel-T limfosit lokal;
DC 100-1.000 kali lebih mampu menstimulasi proliferasi sel T dan peningkatan antigen daripada makrofag dan sel B.
(6) Selain menginduksi limfosit T sitotoksik spesifik antigen, DC juga dapat secara langsung atau tidak langsung mempengaruhi proliferasi sel B dan mengaktifkan respons imun humoral.
1.1.2. Vaksin sel tumor DC
Saat ini, sejumlah besar sel dendritik dapat diperoleh dengan mengkultur darah tepi pasien atau sel mononuklear sumsum tulang dengan sitokin seperti GM-CSF, IL-4, TNF-α dan Fit3-L. Antigen tumor dapat dimuat ke DC dalam bentuk gen, peptida, protein atau bahkan sel utuh, sehingga membuat persiapan vaksin sel DC secara signifikan lebih mudah daripada vaksin sel tumor yang dimodifikasi secara genetik, sehingga memfasilitasi masuknya vaksin DC ke dalam tubuh. uji klinis.
Gen antigen tumor dari sebagian besar tumor padat belum dipahami dengan baik dan jumlah antigen tumor yang teridentifikasi dengan jelas masih sangat sedikit. Ada juga kurangnya bukti in vivo mengenai apakah antigen terkait tumor yang diketahui benar-benar mewakili antigen penolakan tumor. Oleh karena itu, fusi sel tumor dengan DC menyediakan semua antigen seluler, dan sel yang menyatu memiliki antigenisitas sel tumor serta fungsi presentasi antigen DC dan aktivasi sel-T, sehingga fungsi pengambilan, pemrosesan, dan presentasi antigen tumor dari DC dapat dimanfaatkan sepenuhnya.
1.2. Sel-sel CIK
Sel pembunuh yang diinduksi sitokin (CIK) adalah kelas baru sel pembunuh tumor yang disiapkan oleh Fakultas Kedokteran Universitas Stanford pada tahun 1991 berdasarkan sel pembunuh yang diaktifkan CD3 (sel CD3AK), yang diperoleh dengan mengkultur bersama sel mononuklear darah perifer manusia dengan berbagai sitokin (misalnya anti-CD3McAb, IL-2, IFN-γ, IL-1α, dll.) Secara in vitro untuk jangka waktu tertentu. Populasi sel heterogen yang diperoleh setelah ko-kultur untuk jangka waktu tertentu. Sel CIK juga dikenal sebagai limfosit T mirip sel NK, karena sel ini mengekspresikan molekul protein membran CD3 dan CD56, dan memiliki keuntungan dari aktivitas anti-tumor yang kuat dari limfosit T dan aktivitas pembunuh tumor yang tidak dibatasi-MHC dari sel NK.
1.2.1. Karakteristik sel CIK
Tingkat proliferasi yang cepat: Masalah rendahnya jumlah sel yang diperoleh dengan ekspansi sel efektor secara in vitro telah terpecahkan.
Aktivitas pembunuh tumor yang tinggi: karena tingkat kelangsungan hidup yang tinggi dan kapasitas proliferasi yang kuat.
Spektrum pembunuh tumor yang luas: Efektif melawan sel tumor dari berbagai asal jaringan.
Ini juga sensitif terhadap sel tumor yang resistan terhadap multi-obat.
Toksisitas minimal terhadap sel prekursor hematopoietik sumsum tulang normal.
Tahan terhadap apoptosis yang dipicu sel tumor dari sel efektor Fas-FasL.
1.2.2. Mekanisme pembunuhan tumor dari sel CIK
1.2.2.1 Pengenalan: Karena efek sitosidal CIK tidak dibatasi-MHC, CD4 dan CD8 tidak penting dalam pengenalan mereka terhadap sel tumor.
1.2.2.2 Mekanisme pembunuhan: Sel CIK membunuh dan melisiskan sel tumor melalui tiga jalur
Pembunuhan langsung sel tumor oleh sel CIK: Ketika distimulasi oleh anti-CD3McAb eksogen atau sel target yang sensitif, sel CIK melepaskan butiran sitoplasma sitotoksik ke dalam ruang ekstra membran, yang memiliki efek pembunuhan langsung pada sel target.
Aktivitas pembunuh tumor dari sejumlah besar sitokin inflamasi yang dihasilkan oleh sel CIK pada saat aktivasi: misalnya IFN-γ, TNF-α, IL-2, dll., tidak hanya memiliki efek penghambatan langsung pada sel tumor, tetapi juga membunuh sel tumor secara tidak langsung dengan memodulasi responsifitas sistem kekebalan tubuh.
Sel CIK menginduksi apoptosis sel tumor: Sel CIK yang mengekspresikan FasL dalam kultur meningkatkan ketahanannya terhadap apoptosis Fas-FasL yang dipicu oleh sel tumor FasL + di satu sisi, dan juga dapat melakukan efek pembunuhan kronis mereka pada sel tumor dengan menginduksi apoptosis pada sel tumor Fas +, memastikan daya tahan jangka panjang dari aktivitas anti-tumor.
1.3. Efek antitumor sinergis dari sel DC dan CIK
DC dan CIK adalah dua komponen penting dari imunoterapi tumor: yang pertama mengenali antigen dan mengaktifkan sistem kekebalan yang diperoleh, sementara yang kedua membunuh sel tumor dengan mengerahkan sitotoksisitasnya sendiri dan mengeluarkan sitokin, kombinasi yang memastikan sistem kekebalan yang efisien dan harmonis.
Sel CIK adalah sel pembunuh non-spesifik yang diinduksi oleh berbagai sitokin dan dapat mengeluarkan berbagai sitokin (misalnya IL-4, IFN-γ, dll.) dan memiliki aktivitas membunuh yang lebih kuat daripada sel LAK dan CD3AK. Dalam studi klinis, telah ditemukan bahwa kemanjuran beberapa pasien yang diobati dengan sel efektor imun dalam imunoterapi sekunder tidak memuaskan, yang diyakini karena resistensi sel tumor terhadap sel efektor imun ini. Kultur bersama sel CIK dan DC secara signifikan meningkatkan spesifisitas pengiriman antigen oleh sel dendritik dan molekul co-stimulatory, selain mempromosikan sekresi IL-12 oleh sel dendritik dan sitotoksisitas oleh sel CIK, sementara memblokir penyerapan IL-12 mengurangi sitotoksisitas sel CIK. Sitotoksisitas sel CIK dikurangi dengan memblokir penyerapan IL-12. Oleh karena itu, kombinasi sel CIK dan DC dalam pengobatan tumor ganas akan membantu meringankan ketidakmampuan kekebalan sel T pada beberapa pasien tumor, sehingga memberikan efek anti-tumor yang sinergis.