Untuk mengoleskan salep mata gentamisin hidroklorida pada kelopak mata, kelopak mata bagian bawah harus dibuka dengan satu tangan, kemudian salep mata dioleskan ke dalam kantung konjungtiva, dan mata ditutup selama 2-3 menit agar obat dapat terserap sempurna. Pasien perlu mencuci tangan sebelum mengoleskan salep mata gentamisin hidroklorida ke kelopak mata, kemudian gunakan satu tangan untuk menarik kelopak mata bawah untuk membuka konjungtiva sebanyak mungkin, kemudian oleskan salep mata ke dalam kantung konjungtiva, tutup mata dan putar bola mata dengan lembut selama 2-5 menit. Jika salep mata telah digunakan, salep harus dibersihkan di dekat pembukaan tabung saat menggunakannya lagi untuk menghindari sisa bakteri. Obat ini kadang-kadang dapat menyebabkan pasien mengalami iritasi mata ringan dan reaksi alergi seperti mata tersumbat, kemerahan, dan gatal.