Faktor-faktor yang mempengaruhi reaksi enzimatik termasuk konsentrasi enzim, konsentrasi substrat reaksi, suhu dan pH, inhibitor dan aktivator.
1. Konsentrasi enzim: ketika faktor lain yang mempengaruhi sudah pasti, semakin tinggi konsentrasi enzim, semakin cepat kecepatan reaksi enzimatik, dengan kata lain, kecepatan reaksi sebanding dengan konsentrasi enzim.
2. Konsentrasi substrat reaksi: ketika faktor-faktor lain sudah pasti, kecepatan reaksi dan konsentrasi substrat menjadi hiperbola persegi panjang, artinya, ketika konsentrasi substrat sangat rendah, kecepatan reaksi sebanding dengan konsentrasi substrat, ketika konsentrasi substrat terus meningkat, peningkatan kecepatan reaksi berangsur-angsur melambat, dan mencapai kecepatan reaksi maksimum, dengan peningkatan konsentrasi substrat, kecepatan reaksi tidak lagi meningkat.
3. Suhu dan pH: Reaksi enzimatik memiliki suhu optimal dan pH optimal, pada suhu optimal dan pH optimal, kecepatan reaksi paling cepat, terlalu tinggi atau terlalu rendah akan memperlambat kecepatan reaksi.
4. Inhibitor dan aktivator: zat yang menghambat atau mengaktifkan reaksi enzimatik.