Cairan yang mengisi rongga ketuban disebut cairan ketuban. Sumber, volume, dan komposisi cairan ketuban berubah secara signifikan selama periode kehamilan yang berbeda. Pada awal kehamilan, cairan ketuban sebagian besar adalah serum ibu yang melewati selaput janin ke dalam rongga ketuban sebagai cairan osmotik; setelah pertengahan kehamilan, urin janin merupakan sumber cairan ketuban yang penting; pada akhir kehamilan, paru-paru janin juga terlibat dalam produksi cairan ketuban, dengan 600-800 mL cairan dari sekresi alveolar yang masuk ke dalam rongga ketuban setiap hari. Cairan ketuban diserap 50% oleh selaput janin. Cairan ketuban terus berganti-ganti di dalam rongga ketuban, sehingga jumlah cairan ketuban relatif konstan. Pertukaran cairan ketuban dengan janin terutama terjadi melalui saluran pencernaan, saluran pernapasan, saluran kemih, dan kulit pra-keratosis.