Tes utama untuk skrining sindrom Down meliputi alfa-fetoprotein, chorionic gonadotropin, dan konsentrasi estriol bebas. Nilai tes normal untuk alfa-fetoprotein berkisar antara 0,7-2,5 MoM; untuk chorionic gonadotropin, nilai rata-rata antara 2,3-2,4 MoM; dan untuk estriol bebas, hasil tes rata-rata sekitar 0,7 MoM. Hasil akhir skrining sindrom Down dihitung dengan menggabungkan ketiga nilai tes ini dan menggunakan perangkat lunak penghitungan khusus untuk menilai risiko janin mengalami sindrom Down berdasarkan usia, berat badan, dan minggu kehamilan ibu hamil. Hasil skrining kurang dari 1/270 umumnya dianggap berisiko rendah, dan hasil di atas ini dianggap berisiko tinggi.