Kantung empedu terletak di rongga perut, di tepi bawah tulang rusuk di perut bagian kanan atas, di belakang hati dalam fossa kandung empedu, berbentuk buah pir, sebagian besar ditutupi oleh hati, dengan penanda tubuh di titik tengah di bawah batas kosta kanan.
Biasanya kantung empedu tidak teraba, ketika kantung empedu membesar karena berbagai penyebab, maka akan teraba di bawah batas kosta kanan, dan nyeri perut meningkat dengan tekanan pada inspirasi dalam, yaitu tanda Murphy positif.
Letak kantung empedu adalah: hati di atas kantung empedu, duodenum dan usus besar melintang di bawahnya, pilorus di sebelah kiri, dan usus besar di sebelah kanan.
Kantung empedu termasuk dalam organ sistem pencernaan dan memiliki fungsi memusatkan, menyimpan, dan mengeluarkan empedu, dan ekskresi empedu ke dalam duodenum dapat meningkatkan pencernaan dan penyerapan lemak.