Biasanya lebih baik melakukan tes di pagi hari dengan perut kosong. Penta Fungsi Tiroid mencakup hormon perangsang tiroid (TSH), tiroksin total (TT4), tiroksin bebas (FT4), triiodotironin total (TT3), dan triiodotironin bebas (FT3). Lima Fungsi Tiroid adalah indikator yang mencerminkan status fisiologis dan fungsional kelenjar tiroid, di mana TSH adalah hormon perangsang tiroid yang disekresikan oleh kelenjar hipofisis, yang mendorong pertumbuhan kelenjar tiroid dan sekresi hormon tiroid, dan merupakan indikator yang paling sensitif untuk mendiagnosis hipotiroidisme primer. TT4, TT3, FT3, FT4 adalah hormon yang disekresikan oleh kelenjar tiroid itu sendiri, dan merupakan indikator fungsi tiroid, dimana FT4 dan FT3 memiliki sensitivitas dan spesifisitas yang lebih baik. Kisaran referensi fungsi tiroid bervariasi dari satu laboratorium ke laboratorium lainnya karena metode pengujian laboratorium yang berbeda, biasanya kisaran referensi setiap indeks adalah sebagai berikut: FT4 11.5-22.7 pmol/L, FT3 3.5-6.5 pmol/L, T3 0.6-1.81 ng/ml, T4 45-109 ng/ml, TSH 0.35-5.5 μIU/ml. Jika terdeteksi fungsi tiroid yang tidak normal, dianjurkan untuk mengunjungi rumah sakit.