Jaringan otot, fibroblas kulit dan limfosit darah tepi juga dapat digunakan untuk mendeteksi aktivitas GAA secara akurat, tetapi semuanya memiliki keterbatasan. Uji aktivitas membutuhkan waktu setidaknya beberapa minggu; kemurnian isolasi limfosit yang buruk akan menyebabkan negatif palsu dalam pengujian. Penggunaan DBS dan uji leukosit di bawah inhibitor acarbose bersifat non-invasif, akurat dan cepat, dan penting untuk diagnosis dini pasien GSD tipe II. Metode DBS yang ditetapkan dalam penelitian ini untuk penentuan aktivitas GAA menunjukkan presisi yang baik dengan variasi intra-batch dalam 8% dan variasi antar-batch dalam 10%. Metode DBS nyaman untuk pengumpulan, penyimpanan, dan transportasi darah, serta menawarkan kemudahan dan kelayakan yang besar untuk penentuan GAA pada pasien di lapangan. Prevalensi GSD tipe II sangat bervariasi sesuai dengan populasi dan distribusi geografis [1,3]. Karena presentasi klinis penyakit yang tidak spesifik dan terbatasnya kesadaran dokter di Cina, hanya 31 kasus GSD II yang telah dilaporkan sejauh ini di daratan Cina [10-14], dan data epidemiologi tentang kejadian GSD II di daratan Cina belum diklarifikasi lebih lanjut setelah skrining bayi baru lahir untuk penyakit ini. Dalam penelitian ini, kami menetapkan bahwa median aktivitas GAA pada kelompok neonatal normal dan anak-dewasa dengan metode DBS masing-masing adalah 27.09 dan 16.36 pmol / (punch?), dan secara signifikan lebih tinggi pada kelompok neonatal dibandingkan dengan kelompok anak-dewasa. nilai rata-rata pada kelompok neonatal normal Australia dan Denmark oleh Meikle dkk [14] menggunakan immunoassay kuantitatif adalah 46.8 dan 45.7 pmol /(punch?h), dibandingkan dengan median 24,4 pmol /(punch?h) pada kelompok orang dewasa Australia, dan Zhang et al [7] melaporkan median GAA 20 pmol /(punch?h) pada metode DBS orang dewasa normal, mirip dengan temuan kami. Karena aktivitas enzim GAA dari pasien dengan GSD tipe II yang terlibat dalam penelitian yang disebutkan di atas semuanya di bawah secara signifikan lebih rendah daripada batas deteksi, perbedaan nilai normal antara kelompok neonatal dan anak-dewasa tidak mempengaruhi diagnosis dan skrining pasien. Dalam penelitian ini, aktivitas GAA diukur pada empat pasien dengan GSD tipe II yang dicurigai secara klinis untuk memperjelas diagnosis. metode DBS menemukan bahwa aktivitas enzim GAA pasien semuanya di bawah batas deteksi, menunjukkan bahwa metode DBS dapat secara akurat membedakan antara pasien dan heterozigot. dalam enam kasus, aktivitas enzim heterozigot melintasi zona nilai rendah dari kontrol normal, sehingga metode DBS tidak dapat membedakan antara heterozigot dan individu normal. Metode leukosit mengukur aktivitas GAA pada tiga pasien dan menemukan bahwa pasien secara signifikan lebih rendah dari normal. Menggabungkan gejala klinis kelemahan otot progresif dengan temuan hipertrofi jantung dan patologi biopsi miokard, anak 2 didiagnosis dengan GSD tipe II infantil, dan pasien 3 dan 4 didiagnosis dengan GSD tipe II yang timbul kemudian. Kesimpulannya, metode DBS memiliki keunggulan sensitivitas, kecepatan, hasil yang tinggi, pengangkutan dan pengawetan sampel yang mudah, dan cocok untuk skrining dan diagnosis GSD tipe II pada bayi baru lahir dan kelompok berisiko tinggi; metode leukosit memiliki keunggulan akurasi, kecepatan dan spesifisitas, dan cocok untuk konfirmasi diagnosis pada pasien yang dicurigai.