Platelet rich plasma (PRP) adalah konsentrat trombosit yang diperoleh dengan sentrifugasi gradien dari seluruh darah autologus, yang kaya akan trombosit. Ketika trombosit diaktifkan, trombosit melepaskan berbagai faktor pertumbuhan yang berperan penting dalam mendorong proliferasi, pertumbuhan, diferensiasi dan pembentukan jaringan osteosit dan osteoblas. Sejak Marx dkk. pertama kali menggunakan tulang cangkok komposit PRP untuk memperbaiki cacat mandibula pada tahun 1998, PRP secara bertahap telah diterapkan dalam perbaikan jaringan di bidang kedokteran gigi, bedah plastik, ortopedi, otolaringologi, dan bedah saraf. Dalam makalah ini, kami mengulas isolasi dan persiapan PRP dan aplikasinya di bidang ortopedi, serta masalah dan prospek penerapannya. 1. Pemisahan dan persiapan PRP PRP adalah konsentrat PLT yang dipisahkan dari darah utuh dengan sentrifugasi gradien densitas sesuai dengan koefisien sedimentasi yang berbeda dari konstituen dalam darah. Jumlah PLT, konsentrasi berbagai faktor pertumbuhan, dan jumlah leukosit dalam PRP yang disiapkan dengan jumlah sentrifugal yang berbeda, gaya sentrifugal, waktu sentrifugal, dan metode aktivasi PLT yang berbeda bervariasi; dan efek biologis dari berbagai prosedur pembedahan dan waktu penerapan PRP juga menghasilkan efek biologis yang berbeda, sehingga menghasilkan perbedaan dalam efek biologis PRP. Persiapan PRP dengan kandungan faktor pertumbuhan yang berbeda sesuai dengan kebutuhan fisiopatologis yang berbeda adalah arah penelitian di masa depan. Metode persiapan PRP secara garis besar dapat dibagi menjadi dua jenis: persiapan manual dan persiapan otomatis sepenuhnya. Proses persiapan manual memang membosankan, tetapi peralatan yang dibutuhkan sederhana dan mudah dilakukan. Persiapan yang sepenuhnya otomatis membutuhkan peralatan khusus, dan saat ini peralatan yang umum digunakan termasuk sistem SmartPReP, sistem Trissee, sistem pengumpulan konsentrat Platele, sistem Curasau, dll. Tidak ada perbedaan yang signifikan dalam jumlah trombosit antara metode pemisahan manual dan metode pemisah trombosit otomatis setelah sentrifugasi, meskipun pemisah trombosit otomatis mudah dioperasikan dan sangat otomatis, dan kemurnian dan konsentrasi trombosit PRP yang disiapkan tinggi, tetapi metode ini umumnya digunakan untuk sejumlah besar darah (umumnya di atas 150 ml) atau kebutuhan untuk membangun saluran sirkulasi vena, dan saat ini terutama digunakan untuk pengumpulan trombosit di bank darah untuk Saat ini, ini terutama digunakan untuk pengumpulan trombosit di bank darah untuk transfusi komponen, yang membatasi aplikasinya yang luas dalam praktik klinis karena biayanya yang tinggi. Setelah satu kali sentrifugasi, darah dapat dibagi menjadi tiga lapisan, lapisan bawah adalah sel darah merah dengan koefisien pengendapan terbesar, lapisan atas adalah supernatan, dan ada lapisan tipis di persimpangan, yaitu lapisan kaya trombosit. Setelah satu kali sentrifugasi, supernatan atau lapisan sel darah merah dibuang, dan kemudian gaya sentrifugasi diubah lagi untuk memisahkan lebih banyak trombosit. Metode dua sentrifugasi masih merupakan metode umum untuk persiapan PRP. Liu Caixia dkk. membandingkan efek PRP yang disiapkan oleh gaya sentrifugasi dan waktu sentrifugasi yang berbeda pada osteogenesis distraksi pada model hewan, dan hasilnya menunjukkan bahwa jumlah trombosit PRP yang disiapkan dengan metode Landesberg dengan dua sentrifugasi (masing-masing 200 × g dan 10 menit) secara signifikan lebih tinggi daripada darah utuh, yaitu 6,17 kali lebih tinggi daripada darah utuh; tingkat pemulihan trombosit lebih dari 86%, dan efek mempromosikan produksi tulang baru lebih jelas. Tingkat pemulihan trombosit lebih dari 86%, dan efek mempromosikan produksi tulang baru lebih jelas. Konsentrasi trombosit PRP yang diperoleh dengan sentrifugasi pada waktu <5 menit tidak berbeda secara signifikan dari darah utuh ketika gaya sentrifugasi> 250 × g. Marx et al. menemukan bahwa konsentrasi trombosit tertinggi pada lapisan eritrosit 2 mm di bawah antarmuka setelah satu sentrifugasi, dan supernatan dibuang dan disentrifugasi lagi dengan kecepatan rendah untuk ekstraksi trombosit yang lebih baik. Namun, sebagian besar ahli percaya bahwa tingkat pemulihan trombosit lebih tinggi dengan menggunakan metode Appel yang dimodifikasi, yaitu, sentrifugasi pertama dengan kecepatan rendah dan kemudian aspirasi seluruh supernatan dan sebagian kecil sel darah merah di bawah lapisan persimpangan dalam tabung sentrifus lain, diikuti dengan sentrifugasi kecepatan tinggi. 2.Mekanisme kerja plasma kaya trombosit Tindakan PRP dilakukan melalui interaksi dan regulasi timbal balik faktor pertumbuhan, yang disekresikan dan segera melekat pada permukaan membran sel target dan mengaktifkan reseptor membran sel. Reseptor membran ini pada gilirannya menginduksi protein pensinyalan intrinsik yang merangsang ekspresi urutan gen normal sel. Dengan demikian, faktor pertumbuhan yang dilepaskan oleh PRP tidak masuk ke dalam sel target dan tidak menyebabkan perubahan sifat genetik sel target, tetapi hanya untuk percepatan proses penyembuhan normal. Meskipun mekanisme kerja semua sitokin yang terlibat dalam perbaikan dan rekonstruksi jaringan masih belum jelas, beberapa efek sitokin pada perbaikan dan rekonstruksi jaringan telah diklarifikasi, seperti: PDGF, salah satu faktor pertumbuhan pertama yang muncul di lokasi fraktur, dapat menstimulasi mitosis sel stroma sumsum tulang dan meningkatkan jumlah osteoblas; menstimulasi pertumbuhan sel endotel dan meningkatkan produksi kapiler di daerah penerima; juga merangsang Ini juga dapat merangsang kemotaksis makrofag monosit. Sebagai faktor mitogenik dan biotropik, TGF-β sangat diekspresikan dalam jaringan tulang traumatis, mendorong kemotaksis dan proliferasi osteoblas, serta meningkatkan sintesis kolagen. Ini merangsang kemotaksis, mitosis dan sintesis serat kolagen osteoblas dan osteoklas, menghambat pembentukan osteoklas dan resorpsi tulang, dan memainkan peran penting dalam perbaikan patah tulang; IGF mempromosikan proliferasi dan migrasi osteoblas dan meningkatkan kelangsungan hidup osteoklas; VEGF menginduksi proliferasi dan migrasi sel endotel dan dengan demikian mempromosikan neovaskularisasi. Selain itu, PLT yang teraktivasi juga melepaskan sejumlah besar protein, yang penting untuk regenerasi jaringan. Trombin dapat merekrut sel endotel dari jaringan di sekitarnya dan meningkatkan viabilitasnya. Di bawah kondisi kultur tiga dimensi vena umbilikalis manusia, trombin dapat menstimulasi proliferasi fibroblast dan pembentukan neokapiler, sambil menginduksi umpan balik negatif, sehingga membatasi sintesis neokapiler. Fibronektin menstimulasi migrasi sel keratin dan mencapai interaksi sel-sel, yang penting untuk pemulihan morfologi sel. PRP sepenuhnya autologus, bebas dari penularan penyakit dan penolakan kekebalan tubuh, yang pada dasarnya memecahkan masalah penularan penyakit dan kesulitan kelangsungan hidup cangkok dalam rekayasa jaringan tulang; PRP mengandung berbagai faktor pertumbuhan dalam konsentrasi tinggi, dan rasio setiap faktor pertumbuhan mirip dengan rasio normal dalam tubuh, dan memiliki efek sinergis terbaik. PRP mengandung konsentrasi tinggi dari berbagai faktor pertumbuhan dalam rasio yang mirip dengan rasio normal in vivo, dengan sinergi optimal antara efek biologis dari faktor tunggal dan interaksi berbagai faktor pertumbuhan. Faktor pertumbuhan yang terkandung dalam PRP tidak masuk ke dalam sel atau inti, yang mempercepat proses penyembuhan normal dan tidak memiliki efek teratogenik atau kemampuan untuk menginduksi pembentukan tumor; PRP mudah dibuat dan tidak terlalu merusak pasien, karena dapat dibuat hanya dengan mengambil darah dari pembuluh darah pasien. Oleh karena itu, PRP adalah prosedur yang aman, sederhana, dan murah yang dapat digunakan dalam berbagai bidang perawatan ortopedi dan memiliki berbagai aplikasi. Namun, masih banyak masalah yang belum terpecahkan dalam penggunaan PRP secara klinis, terutama di bidang ortopedi, seperti kurangnya standar yang seragam untuk persiapan PRP, perbedaan besar dalam konsentrasi faktor pertumbuhan PRP yang disiapkan dengan metode yang berbeda, jumlah faktor pertumbuhan yang terkandung dalam PRP dan mekanisme interaksinya masih belum jelas. Oleh karena itu, penelitian tentang PRP pertama-tama harus menetapkan serangkaian metode persiapan PRP dengan efisiensi dan stabilitas tinggi, kerusakan rendah pada PLT, kemurnian dan stabilitas tinggi; kedua, hindari faktor-faktor yang mempengaruhi kemanjuran PRP saat menerapkan PRP; pilih pembawa yang sesuai untuk mengikat PRP ke pembawa untuk meningkatkan kemampuan regenerasi tulang PRP, buat model hewan, dan rancang tes standar untuk memberikan dasar bagi aplikasi klinis PRP.