Ada banyak tes berbeda yang tersedia, tetapi semuanya memiliki spesifisitas yang buruk. Pada atresia bilier, bilirubin serum total meningkat dan proporsi bilirubin satu menit juga meningkat. Nilai alkali fosfatase yang tinggi secara abnormal berguna untuk tujuan diagnostik. Υ-glutamyltransferase Nilai puncak di atas 300 IU / L secara persisten tinggi atau meningkat dengan cepat. 5′ tingkat nukleotidase meningkat dengan hiperplasia saluran empedu yang signifikan dan diukur pada> 25 IU / L. Tes hemolisis hidrogen peroksida eritrosit adalah metode yang kompleks dan positif jika hemolisis di atas 80%. Nilai puncak alpha-fetoprotein di bawah 40 μg/ml dan tes fungsi hati rutin lainnya tidak memiliki signifikansi diskriminatif. Patogenesis penyakit kuning, perubahan warna pada tinja dan patologi abdomen harus ditelusuri untuk analisis yang komprehensif. Tes berikut ini saat ini dianggap memiliki beberapa nilai diagnostik. (i) Pengamatan dinamis bilirubin serum: pengukuran mingguan bilirubin serum, jika kurva jumlah bilirubin cenderung menurun seiring dengan perjalanan penyakit, mungkin hepatitis; jika terus meningkat, itu menunjukkan atresia bilier. Namun demikian, hepatitis berat dengan obstruksi bilier ekstrahepatik juga dapat menunjukkan peningkatan yang terus menerus, yang membuat diferensiasi menjadi sulit. (b) Ultrasonografi: Jika tidak ada kantung empedu yang terlihat atau jika kantung empedu yang kecil (kurang dari 1,5 cm) terlihat, maka dicurigai adanya atresia bilier. Jika kantung empedu normal terlihat ada, ini mendukung hepatitis. Jika pola distribusi saluran empedu intrahepatik dapat dilihat, ini akan lebih membantu dalam diagnosis. (iii) Uji ekskresi 99mTc-diethyl iminodiacetic acid (DIDA): Uji ini telah menggantikan uji ekskresi rosacea berlabel 131 iodin dalam beberapa tahun terakhir dan memiliki tingkat ekstraksi hepatosit yang tinggi (48%-56%), yang lebih unggul daripada item lainnya. Ini dapat mendiagnosis obstruksi parsial saluran empedu akibat kelainan struktural. Jika kista saluran empedu umum atau striktur saluran empedu ekstrahepatik terjadi dengan obstruksi total, pemindaian tidak menunjukkan visualisasi usus dan dapat digunakan sebagai pembeda untuk depresi bilier intrahepatik yang parah. Pada tahap awal atresia bilier, hepatosit berfungsi dengan baik dan hati terlihat dalam waktu 5 menit, tetapi tidak ada visualisasi saluran empedu yang terlihat kemudian, atau bahkan 24 jam kemudian, tidak ada visualisasi usus yang terlihat. Pada hepatitis neonatal, saluran empedu ekstrahepatik terbuka dan usus divisualisasikan, meskipun hepatosit tidak berfungsi dengan baik. (iv) Kuantifikasi lipoprotein-X (Lp-x): Lipoprotein-X adalah lipoprotein densitas rendah yang meningkat dengan adanya obstruksi bilier. Telah dipelajari bahwa semua kasus atresia bilier meningkat dan positif pada usia yang sangat muda, sementara kasus hepatitis neonatal negatif sejak awal tetapi dapat berubah menjadi positif seiring bertambahnya usia. Atresia bilier dapat disingkirkan jika Lp-X negatif pada usia lebih dari 4 minggu; jika >500mg/dl, atresia bilier lebih mungkin terjadi. Jika kadarnya menurun, diagnosis sindrom hepatitis neonatal didukung; jika terus meningkat, kemungkinan besar terjadi atresia bilier. (e) Penentuan kuantitatif asam empedu: baru-baru ini diterapkan pada metode kuantitatif total asam empedu serum kertas darah, total asam empedu serum pada atresia bilier adalah 107-294μmol / L, umumnya dianggap mencapai 100μmol / L adalah empedu yang tertekan, usia yang sama tanpa kelompok kontrol ikterus hanya 5-33μmol / L, rata-rata 18μmol / L, sehingga memiliki nilai diagnostik. Asam empedu urin juga merupakan alat skrining awal. Rata-rata total asam empedu urin pada atresia bilier adalah 19,93±7,53μmol/L dibandingkan dengan 1,60±0,16μmol/L pada kelompok kontrol, yang 10 kali lebih besar dari anak-anak normal. (vi) Kolangiografi: ERCP telah digunakan untuk diagnosis diferensial awal. Kondisi atresia bilier berikut ini ditemukan pada pencitraan: (i) hanya saluran pankreas yang divisualisasikan; (ii) kadang-kadang kelainan penggabungan pankreatikobiliari dapat ditemukan, dan saluran pankreas dan bilier dapat divisualisasikan, tetapi saluran empedu intrahepatik tidak divisualisasikan, menunjukkan atresia tipe intrahepatik. Sindrom hepatitis neonatal memiliki tanda-tanda berikut: (i) saluran pankreatikobilier normal; (ii) saluran empedu umum divisualisasikan, tetapi tipis. (vii) Histologi patologi tusukan hati: biopsi tusukan hati, atau pencitraan dan biopsi tusukan hati perkutan umumnya direkomendasikan. Hepatitis neonatal ditandai dengan struktur lobular yang tidak selaras, nekrosis hepatoseluler, degenerasi seluler raksasa dan peradangan portal. Manifestasi utama atresia bilier adalah hiperplasia saluran empedu dan emboli empedu yang ditandai, dan fibrosis periportal, meskipun pada beberapa spesimen sel raksasa berinti banyak juga dapat terlihat. Karena alasan ini, biopsi hati terkadang sulit atau bahkan salah, dan dalam 10-15% kasus, diagnosis yang benar tidak dapat dibuat atas dasar ini. Kesimpulannya, setelah atresia bilier sangat dicurigai pada bulan pertama kehidupan, berbagai metode diagnostik diferensial harus dilakukan, seperti investigasi klinis, laboratorium, ultrasonografi, radiologis dan histologis, dan eksplorasi bedah juga harus dipertimbangkan. Dalam kasus di mana penyakit ini mendekati usia 2 bulan dan diagnosis masih belum diketahui, sayatan perut kanan atas harus dibuat untuk mendapatkan spesimen jaringan hati dan kolangiogram dengan manipulasi minimal. Jika kantung empedu ditemukan, empedu normal diperoleh dengan tusukan, menunjukkan bahwa sistem empedu proksimal tidak tersumbat, dan pencitraan intraoperatif dilakukan untuk menentukan sistem empedu distal. Jika saluran empedu ekstrahepatik tidak tersumbat, biopsi eksisi atau biopsi tusukan dilakukan dari kedua lobus hati untuk memudahkan diagnosis. Dalam kasus kantung empedu yang kecil dan atrofi dengan empedu putih, kolangiogram tetap harus dicoba, karena kantung empedu yang kempis dapat terlihat pada neonatus dengan depresi empedu intrahepatik yang parah atau defisiensi saluran empedu intrahepatik. Jika angiogram menunjukkan saluran empedu ekstrahepatik yang kecil dan displastik, tetapi saluran empedu tersebut paten, prosedur ini diakhiri dengan biopsi. Jika kantung empedu atretik atau tidak ada, jaringan daerah hilar dibedah dan anastomosis hilar-enterik dilakukan. Pada kasus tipikal atresia bilier, bayi lahir cukup bulan dan sering dianggap normal oleh orang tua dan dokter pada 1 hingga 2 minggu setelah lahir, kebanyakan dari mereka tidak memiliki kelainan dan fesesnya berwarna normal. Ikterus biasanya menjadi jelas secara bertahap pada 2 hingga 3 minggu setelah lahir, dalam beberapa kasus muncul dalam beberapa hari pertama setelah lahir dan kemudian salah didiagnosis sebagai ikterus fisiologis. Kotoran menjadi kuning kecoklatan, kuning pucat, krem, dan kemudian menjadi putih keabu-abuan seperti tanah liat bebas empedu. Namun demikian, pada stadium penyakit yang lebih lanjut, warna kekuningan yang sedikit mungkin kadang-kadang muncul, akibat peningkatan konsentrasi pigmen empedu dalam darah dan organ lainnya, serta sejumlah kecil pigmen empedu yang memasuki lumen usus melalui mukosa usus dan tercampur ke dalam feses. Air seni lebih gelap dan menodai popok dengan warna kuning. Penyakit kuning biasanya tidak mereda dan semakin dalam, kulit menjadi kuning keemasan atau bahkan coklat dan mungkin tergores oleh gatal-gatal, kadang-kadang dengan fibroid lipomatosa, tetapi ini jarang terjadi. Kasus individual dapat mengembangkan jari-jari alu atau disertai sianosis. Hati membesar dan teksturnya keras. Limpa jarang dirasakan pada tahap awal dan jika limpa yang membesar dirasakan dalam beberapa minggu pertama, mungkin penyebabnya adalah penyebab intrahepatik, dengan hipertensi portal yang berkembang seiring perkembangan penyakit. Pada tahap awal penyakit ini, bayi masih dalam kondisi umum yang baik, tetapi memiliki berbagai tingkat malnutrisi dan berat badan yang kurang untuk panjang dan berat badan. Sering kali ibu melaporkan bahwa bayinya tampak bersemangat dan gelisah, suatu kondisi yang mungkin terkait dengan peningkatan asam empedu serum. Berbagai defisiensi vitamin yang larut dalam lemak dapat terjadi pada tahap akhir penyakit ini, dan defisiensi vitamin D dapat dikaitkan dengan manik-manik rakhitis dan epifisis yang luas. Karena status hemodinamik yang berubah, hubungan arus pendek arteriovenosa parsial dan berkurangnya resistensi pembuluh darah perifer, murmur jantung bervolume tinggi dapat terdengar di daerah prekordial dan bidang paru-paru.